ニトロソアミンとは、アミンにニトロソ基が結合した化学構造を持つ一連の化合物を指します。これらの化合物は、酸性条件下において、二級、三級、または四級アミンと亜硝酸との間のニトロソ化反応によって生成される可能性があります。ニトロソアミン化合物は、いくつかの動物種において強力な遺伝毒性を示す物質であり、その一部は国際がん研究機関（IARC）によって、ヒトに対して発がん性がある可能性が高い、あるいは発がん性があるかもしれない物質に分類されています。ほぼすべての規制当局が、ニトロソアミン管理のための確認試験および低減計画の提出に関する期限を設けています。規制当局による査察の結果、原薬（API）および医薬品のニトロソアミン管理において、GMP（医薬品の製造管理及び品質管理の基準）上の不備が明らかになっています。その主な原因は、製造業者が原薬および最終製品の双方におけるニトロソアミン濃度を管理するための、動的かつ製品のライフサイクル全体にわたるプロセスを導入できていないことにあります。

ニトロソアミンの生成過程

酸性条件下において、二級、三級、または四級アミンと亜硝酸塩が存在する場合、ニトロソアミンが生成する可能性があります。こうした条件下では、亜硝酸塩から亜硝酸が生成され、それがアミンと反応してニトロソアミンを形成することがあります。残留アジドをクエンチ（失活）させるために亜硝酸を使用する場合や、アミン前駆体が存在する状態で分子にアジド官能基を導入する場合には、ニトロソアミン生成のリスクが高まります。

製造工程においてアミンが混入・存在し得る要因は様々です。API（医薬品有効成分）の中間体や原料に、二級または三級アミン官能基が含まれている場合があります。また、試薬や触媒として、三級または四級アミンが意図的に添加されることもあります。これらすべてのアミンは、亜硝酸やその他のニトロソ化剤と反応し、API中でニトロソアミンを生成する可能性があります。

製剤（最終製品）において、亜硝酸塩は一般的なニトロソ化不純物であり、多くの添加剤中にppmレベルで存在することが報告されています。一般的に使用される添加剤に亜硝酸塩不純物が含まれていると、製造中や保存期間中に医薬品中でニトロソアミン不純物が生成されたり、その量が増加したりする可能性があります。

実質的なGMPのギャップ

GMPの下では、査察官は企業に対し、明確なリスク評価、妥当性が裏付けられた管理策、そして追跡可能な意思決定を通じて、高リスクな不純物に関する懸念を管理することを求めています。査察官は、文書の量よりも、管理戦略が特定されたリスクと明確に結びついているかどうかに重点を置いています。

繰り返し指摘される監査事項

規制当局による監査において、原薬（API）および医薬品のニトロソアミン・リスク評価における、繰り返し見られるいくつかの不備が特定されました。

• ニトロソアミン生成につながる一般的な条件が特定されておらず、プロセスに関する理解に不備があることが示唆されている。
• 合成および製剤化の過程でニトロソアミンを生成し得る二次、三次、および四次アミンの供給源について、検証が不十分である。
• 添加剤供給業者の分析証明書（CoA）に過度に依存し、独自に評価を行っていないため、バッチごとにニトロソアミン不純物レベルが変動する可能性がある。
• 主反応混合物中で直接クエンチ工程を行うことによるニトロソアミン生成のリスクがあり、プロセスの最適化および管理が不十分であることが示唆されている。
• 回収溶媒について、ニトロソアミン不純物の分析が行われていない。
• 適切な根拠なしにリスクが文書化され、結論が導き出されている。

3段階リスク評価方針

これらのギャップに対処するために、APIおよび医薬品メーカーは、 3段階のリスク評価方針：

1. 原薬（API）、市販製品、および承認済みまたは申請中の製品におけるニトロソアミン不純物のリスクを評価してください。リスク評価は、優先順位を考慮し、適時実施する必要があります。
2. ニトロソアミン不純物が混入するリスクがある場合は、確認試験を実施してください。
3. 原薬および医薬品におけるニトロソアミン不純物を防止または低減するために実施した変更については、FDAに報告してください。

リスクアセスメントにおけるよくある間違い

不適切なサプライチェーン管理

多くの組織では、試薬、触媒、溶媒中に不純物として存在する二級アミンや三級アミンの特定および分析が行われていません。これらはAPI（医薬品有効成分）の直接的な構成成分ではありませんが、API中でのニトロソアミン生成に関与する可能性があります。したがって、二級アミンや亜硝酸塩を見過ごすことはリスクを伴います。

添加剤中の亜硝酸塩濃度の適切な特定

製剤化に使用される添加剤には、亜硝酸塩の含有量にばらつきが生じるリスクがあります。企業は亜硝酸塩濃度に関して添加剤メーカーが発行するCoA（分析証明書）に依存する傾向があり、その結果、実態との乖離を見落とすことが少なくありません。こうした濃度のばらつきはニトロソ化剤として作用し、製剤に重大な影響を及ぼす可能性があるほか、保存期間中にその影響が顕在化することもあります。したがって、供給業者のCoAを過信することは、ニトロソアミン生成のリスク要因となり得ます。

手法および技術に関連する誤り

分析手法の選定において、試料調製中にニトロソアミンが生成するリスクが見落とされることがよくあります。過度な超音波処理や強酸性の希釈液の使用は、ニトロソアミン不純物の偽陽性（人為的な生成）を引き起こす可能性があります。したがって、分析手法の選定には細心の注意を払う必要があります。

分析による実証を行わずに、合成・製造プロセスにおけるニトロソアミン除去能力を過大評価することはよくある誤りであり、これがニトロソアミン不純物に関する不適合の一因となる場合もあります。高感度かつ検出限界（LOD）の低い分析法を開発し、バリデーションを行うことが極めて重要です。LODが高すぎると、実際にはLODを超えて存在している場合であっても、ニトロソアミンの測定結果が「不検出」と報告されてしまう可能性があります。 許容摂取量（AI）の限度.

評価における不備：交差汚染および包装資材

多くの組織では、文書化を目的とした形式的な手続きとして一度だけリスク評価を行い、その後はそれを見直すことがありません。たとえ合成プロセスの変更、原材料の供給業者の変更、製造設備の変更、あるいは特殊な包装資材の導入といった事態が生じた場合であっても、同様です。こうした変更はそれぞれ評価の対象とすべきであり、それに応じてリスク評価およびリスク低減策を改定する必要があります。適切な時期に適切に対処しなければ、こうした運用の不備は深刻なコンプライアンス上の懸念事項となりかねません。

規制遵守への影響

上記のようなリスク評価の不備は、規制遵守上の不備につながる可能性があります。多くの組織が、規制当局への申請書類におけるCMC（化学・製造・品質管理）のセクションにおいて、依然としてリスク評価を適切に報告できていないためです。

QCラボのための先制的な戦略

医薬品を取り巻く厳しい環境下において、ニトロソアミンの管理は、品質管理（QC）ラボが主体的に取り組むべき課題です。単なる確認試験にとどまらず、最新の分析技術を駆使した詳細な試験へと重点を移していく必要があります。

分析能力

• ニトロサミンは許容摂取量（AI）の閾値が極めて低いため、その微量​​不純物を検出するには高感度なLC-MS/MSプラットフォームが必要とされており、QC（品質管理）ラボではこうしたシステムへの移行が進んでいます。
• ラボは、反応モニタリングの際、既知の化合物だけでなく、未知のニトロサミンの特定にも積極的に取り組むべきです。
• サンプル調製法については、分析過程でニトロサミンが生成する（in situ生成）可能性を最小限に抑えるような手法を開発する必要があります。

安定性試験および日常モニタリング

品質管理（QC）試験室は、供給業者の分析証明書（CoA）のみに依存すべきではありません。原材料、試薬、および回収溶媒については、独自に試験を実施する必要があります。

安定性試験におけるニトロサミン試験は安定性試験計画の不可欠な要素であり、バッチの出荷判定時のみに限定すべきではありません。これは、有効期間中にニトロサミンが生成・増加するリスクが常に存在するためです。

ニトロサミン濃度が許容摂取量（AI）の10%未満である場合、日常的なモニタリングは免除される可能性があります。しかし、結果がAIの30%を超える場合は、バッチごとの試験が必須となります。

よくある質問:

Reference:

• Center. “Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs.” U.S. Food and Drug Administration, 2024, https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/control-nitrosamine-impurities-human-drugs.
• “Nitrosamine Impurities | European Medicines Agency (EMA).” European Medicines Agency (EMA), 28 Oct. 2019, https://www.ema.europa.eu/en/human-regulatory-overview/post-authorisation/referral-procedures-human-medicines/nitrosamine-impurities.
• “ICH M7 Assessment and Control of DNA Reactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit Potential Carcinogenic Risk – Scientific Guideline | European Medicines Agency (EMA).” European Medicines Agency (EMA), 24 Sept. 2014, https://www.ema.europa.eu/en/ich-m7-assessment-control-dna-reactive-mutagenic-impurities-pharmaceuticals-limit-potential-carcinogenic-risk-scientific-guideline.