O termo nitrosamina descreve uma classe de compostos que apresentam a estrutura química de um grupo nitroso ligado a uma amina. Esses compostos podem ser formados por meio de uma reação de nitrosação entre aminas secundárias, terciárias ou quaternárias e ácido nitroso em condições ácidas. As nitrosaminas são agentes genotóxicos potentes em diversas espécies animais, e algumas são classificadas como prováveis ​​ou possíveis carcinógenos humanos pela Agência Internacional de Pesquisa em Câncer (IARC). Praticamente todos os órgãos reguladores estabeleceram prazos para a realização de testes confirmatórios e a apresentação de planos de mitigação para o controle de nitrosaminas. Auditorias regulatórias revelaram falhas reais nas Boas Práticas de Fabricação (BPF) relacionadas ao controle de nitrosaminas em Insumos Farmacêuticos Ativos (IFAs) e medicamentos, decorrentes principalmente da não implementação, por parte dos fabricantes, de um processo dinâmico e contínuo para controlar os níveis de nitrosaminas tanto nos IFAs quanto nos produtos acabados.

Como as nitrosaminas se formam

A formação de nitrosaminas é possível na presença de aminas secundárias, terciárias ou quaternárias e sais de nitrito em condições ácidas. Nessas condições, os sais de nitrito podem formar ácido nitroso, o qual pode reagir com uma amina para formar uma nitrosamina. Existe um risco maior de formação de nitrosaminas se o ácido nitroso for utilizado para neutralizar a azida residual ou se o grupo funcional azida for introduzido na molécula na presença de aminas precursoras.

As aminas podem estar presentes no processo de fabricação por diversos motivos. O intermediário do IFA (Insumo Farmacêutico Ativo) ou as matérias-primas do IFA podem conter grupos funcionais de aminas secundárias ou terciárias. Aminas terciárias ou quaternárias também podem ser adicionadas intencionalmente como reagentes ou catalisadores. Todos esses tipos de aminas podem reagir com o ácido nitroso ou outros agentes nitrosantes e podem formar nitrosaminas no IFA.

Nos produtos acabados, os nitritos são impurezas nitrosantes comuns, já tendo sido relatada a sua presença em muitos excipientes em níveis de ppm. Impurezas de nitrito são encontradas em excipientes de uso comum, o que pode levar à formação de impurezas do tipo nitrosamina no medicamento durante a fabricação e resultar em um aumento dessas impurezas ao longo do prazo de validade.

Lacunas Reais de BPF

No âmbito das BPF (Boas Práticas de Fabricação), espera-se que as empresas gerenciem questões relacionadas a impurezas de alto risco por meio de avaliações de risco claras, controles fundamentados e decisões rastreáveis. O foco recai menos sobre o volume de documentos e mais sobre a existência de uma conexão clara entre as estratégias de controle e os riscos identificados.

Constatações de auditoria recorrentes

Auditorias regulatórias identificaram diversas falhas recorrentes nas avaliações de risco de nitrosaminas para IFAs e medicamentos.

• Falha em identificar as condições gerais que levam à formação de nitrosaminas, indicando lacunas na compreensão do processo.
• Verificação insuficiente das fontes de aminas secundárias, terciárias e quaternárias que podem formar nitrosaminas durante a síntese e a formulação.
• Dependência excessiva de Certificados de Análise (CoAs) de fornecedores de excipientes sem avaliação independente, o que pode levar a níveis variáveis ​​de impurezas de nitrosaminas entre lotes.
• Risco de formação de nitrosaminas quando uma etapa de quenching (interrupção da reação) é realizada diretamente na mistura reacional principal, indicando falta de otimização e controle do processo.
• Ausência de análise de solventes recuperados quanto à presença de impurezas de nitrosaminas.
• Documentação de riscos e conclusões formuladas sem fundamentação adequada.

Política de Avaliação de Riscos em Três Etapas

Para sanar essas lacunas, os fabricantes de IFA (Ingrediente Farmacêutico Ativo) e de medicamentos devem adotar uma política de avaliação de riscos em três etapas:

1. Avalie o risco de impurezas de nitrosaminas em IFAs (Insumos Farmacêuticos Ativos), produtos comercializados e produtos objeto de solicitações aprovadas ou em análise. As avaliações de risco devem ser realizadas de forma oportuna e prioritária.
2. Realize testes confirmatórios sempre que houver risco de presença de impurezas de nitrosaminas.
3. Comunique à FDA as alterações implementadas para prevenir ou reduzir impurezas de nitrosaminas em IFAs e medicamentos.

Erros comuns em avaliações de risco

Gestão Inadequada da Cadeia de Suprimentos

A maioria das organizações falha em identificar e analisar as aminas secundárias e terciárias presentes em reagentes, catalisadores e solventes como impurezas. Embora não façam parte diretamente do IFA (Ingrediente Farmacêutico Ativo), elas podem contribuir para a formação de nitrosaminas no IFA. Portanto, é arriscado negligenciar aminas secundárias ou nitritos.

Identificação adequada dos níveis de nitrito em excipientes

Existe o risco de variações nos níveis de nitrito presentes nos excipientes utilizados na formulação. As empresas tendem a confiar no Certificado de Análise (CoA) fornecido pelo fabricante do excipiente quanto aos níveis de nitrito e, frequentemente, deixam de identificar eventuais lacunas. Essas variações nos níveis podem atuar como agentes nitrosantes e impactar significativamente a formulação, o que pode ser observado ao longo do prazo de validade. Portanto, a dependência excessiva dos CoAs dos fornecedores representa uma ameaça potencial de formação de nitrosaminas.

Erros Técnicos e Relacionados ao Método

As metodologias analíticas frequentemente ignoram o risco de formação de nitrosaminas durante o preparo da amostra. A sonicação excessiva ou o uso de diluentes altamente ácidos podem desencadear a formação de impurezas do tipo nitrosamina, gerando resultados falso-positivos. Deve-se ter extremo cuidado ao selecionar os métodos analíticos.

Superestimar a capacidade do processo de síntese ou fabricação de remover nitrosaminas, sem a devida confirmação analítica, é um erro comum que também pode contribuir para falhas relacionadas a impurezas de nitrosaminas. É fundamental desenvolver e validar métodos analíticos que apresentem alta sensibilidade e baixo limite de detecção (LOD). Se o LOD for muito elevado, os resultados para nitrosaminas podem ser reportados como “Não Detectado”, mesmo quando estas estiverem presentes em níveis acima do LOD ou acima… limites de ingestão aceitável (AI).

Lacunas na Avaliação: Contaminação Cruzada e Material de Embalagem

A maioria das organizações realiza uma avaliação de risco pontual apenas como uma formalidade para fins de documentação e nunca a revisita, mesmo quando ocorrem alterações no processo de síntese, mudanças de fornecedor de matérias-primas, modificações nos equipamentos de fabricação ou a introdução de materiais de embalagem especializados. Cada uma dessas alterações deve ser avaliada, e uma avaliação de risco revisada, juntamente com um plano de mitigação, deve ser elaborada em conformidade. Essa lacuna operacional pode se tornar uma séria questão de conformidade se não for tratada de forma adequada e oportuna.

Impacto na conformidade regulatória

As falhas na avaliação de riscos mencionadas acima podem levar a falhas na conformidade regulatória, uma vez que muitas organizações ainda deixam de relatar adequadamente as avaliações de risco nas seções de Química, Fabricação e Controle (CMC) de suas submissões regulatórias.

Estratégias Proativas para Laboratórios de Controle de Qualidade

No desafiador cenário farmacêutico, o controle de nitrosaminas deve ser gerido de forma proativa pelos laboratórios de controle de qualidade. O foco deve se voltar para análises aprofundadas com o uso de técnicas analíticas modernas, em vez de se restringir apenas a testes confirmatórios.

Capacidades analíticas

• Os laboratórios de controle de qualidade estão migrando cada vez mais para plataformas de LC-MS/MS de alta sensibilidade, necessárias para detectar impurezas de nitrosaminas em níveis muito baixos, visto que esses compostos apresentam limites de ingestão aceitável (AI) muito reduzidos.
• Os laboratórios devem buscar proativamente identificar nitrosaminas desconhecidas durante o monitoramento da reação, e não apenas os compostos já identificados.
• As técnicas de preparo de amostras devem ser desenvolvidas de modo a minimizar a probabilidade de formação de nitrosaminas in situ.

Testes de estabilidade e monitoramento de rotina

Os laboratórios de controle de qualidade não devem depender exclusivamente do Certificado de Análise (CoA) do fornecedor. Devem ser realizados testes independentes em matérias-primas, reagentes e solventes recuperados.

A análise de nitrosaminas durante estudos de estabilidade é parte integrante do protocolo de estabilidade e não deve limitar-se apenas à liberação de lotes, visto que sempre existe o risco de formação e aumento de nitrosaminas ao longo do prazo de validade.

O monitoramento de rotina de nitrosaminas pode ser dispensado se os níveis estiverem abaixo de 10% do limite de AI (Acceptable Intake). No entanto, se os resultados ultrapassarem 30% do limite de AI, a realização de testes lote a lote torna-se obrigatória.

Perguntas frequentes:

Reference:

• Center. “Control of Nitrosamine Impurities in Human Drugs.” U.S. Food and Drug Administration, 2024, https://www.fda.gov/regulatory-information/search-fda-guidance-documents/control-nitrosamine-impurities-human-drugs.
• “Nitrosamine Impurities | European Medicines Agency (EMA).” European Medicines Agency (EMA), 28 Oct. 2019, https://www.ema.europa.eu/en/human-regulatory-overview/post-authorisation/referral-procedures-human-medicines/nitrosamine-impurities.
• “ICH M7 Assessment and Control of DNA Reactive (Mutagenic) Impurities in Pharmaceuticals to Limit Potential Carcinogenic Risk – Scientific Guideline | European Medicines Agency (EMA).” European Medicines Agency (EMA), 24 Sept. 2014, https://www.ema.europa.eu/en/ich-m7-assessment-control-dna-reactive-mutagenic-impurities-pharmaceuticals-limit-potential-carcinogenic-risk-scientific-guideline.